Određivanje promjene u ekspresiji gena CAIX u tumorskim stanicama izloženim derivatima kumarina ; Determination of changes in CAIX gene expression in cells exposed to coumarine derivatives

Uvod: Karboanhidraza IX, kao jedan od ključnih enzima u procesu održavanja acido-bazne ravnoteže tumora, predstavlja ciljano središte protutumorske terapije. Inhibicijom njezinog aktivnog mjesta omogućena je kontrola regulacije stvaranja potrebnog mikrookoliša za daljnju proliferaciju tumorskih stanica. U ovom su istraživanju za inhibiciju CAIX korišteni derivati kumarina NS48, NS51 i A153. Kumarin je zbog svoje karakteristične aktivnosti dobar inhibitor aktivnog mjesta CAIX. Cilj: Cilj je istraživanja odrediti utjecaj kumarinskih derivata na gensku ekspresiju CAIX u stanicama adenokarcinoma grlića maternice i stanicama karcinoma debelog crijeva. Materijali i metode: Stanične linije korištene u istraživanju su HeLa stanice adenokarcinoma grlića maternice i Caco-2 stanice karcinoma debelog crijeva. Stanice su tretirane kumarinskim derivatima NS48, NS51 i A153. Nakon kultivacije, RNA je izolirana i ekspresija određena qRT-PCR-om. Vrijednosti dobivene qRT-PCR reakcijom obrađene su ΔΔCT metodom kako bi se kvantificirala razina genske ekspresije. Rezultati: Tretman stanica adenokarcinoma grlića maternice, kao i stanica karcinoma debelog crijeva, kumarinskim derivatima pokazuju povećanje genske ekspresije za CAIX. Uzrok povećanja genske ekspresije pretpostavka je da je došlo do blokiranja aktivnog mjesta enzima navedenim derivatima. Zaključak: Kumarinski derivati NS48, NS51 i A153 uzrokuju povećanje ekspresije gena za CAIX u svim ispitivanim uzorcima. ; Introduction: Carbonic anhydrase IX, as one of the key enzymes in the process of maintenance of acid-base balance of tumors, is the center target for anti-cancer therapy. Inhibition of its' active site enables the regulation of the micro environment which prevents further proliferation of tumor cells. In this study the compounds used to inhibit CAIX are derivatives of coumarin, NS48, NS51 and A153. Coumarin is a potent inhibitor of CAIX active site and thus affect the change in the level of gene expression for CAIX. Goals: The goal is to determine the effect of ...