Caracterización funcional y estructural de la proteína Factor H-related B (FHR-B) del sistema del complemento del ratón

Tesis inédita de la Universidad Complutense de Madrid, Facultad de Ciencias Químicas, leída el 05-05-2022 ; La existencia de proteínas relacionadas con el factor H (FHR) en el ratón se conoce desde hace algún tiempo, pero aún no está claro su equivalencia funcional, si la hay, con las FHR humanas. Este conocimiento es relevante para modelar en ratones enfermedades que implican a las FHR humanas. Combinando cromatografía de afinidad y estrategias proteómicas hemos confirmado la presencia en plasma de ratón de FHR-B, FHR-C y FHR-E. De acuerdo con datos previos, hemos visto que FHR-B compite con la regulación por el FH murino en ensayos de hemólisis con glóbulos rojos de cobaya, y que también lo hace en ensayos de hemólisis con eritrocitos de oveja, mientras que FHR-C y FHR-E no compiten en ambos. FHR-B se une a C3 nativo y a los fragmentos activados C3b, iC3b y C3dg. Análisis de ultracentrifugación analítica sugieren que FHR-B está parcialmente dimerizado. El sitio de unión de C3b en FHR-B está ubicado en la región C-terminal, mientras que el putativo dominio de dimerización de FHR-B probablemente involucra la región N-terminal. El estudio de la secuencia de aminoácidos sugiere que la proteína FHR-B de ratón presenta un dominio de ácido siálico en sus regiones C-terminales. Sin embargo, nuestros análisis indican que este sitio de unión de ácido siálico no es funcional. ; The existence of factor H-related proteins (FHRs) in mouse is known for some time, but it is still unclear their functional equivalence, if any, with the human FHRs. This knowledge is relevant to model in mice diseases implicating the human FHRs. By combining affinity chromatography and proteomic strategies we confirm the presence in mouse plasma of FHR-B, FHR-C and FHR-E. In agreement with previous data FHR-B competes mouse FH regulation in guinea pig red cell hemolysis assays, but also in the sheep hemolysis assay, while FHR-C and FHR-E do not compete in both. FHR-B binds native C3 and the activated fragments C3b, iC3b and C3dg and ...