Papel de los RNAs no-codificantes de proteínas en el metabolismo lipídico intestinal ; Role of non-coding RNAs on intestinal lipid metabolism

Tesis inédita de la Universidad Complutense de Madrid, Facultad de Ciencias Biológicas, leída el 29/09/2020 ; La dieta desequilibrada es uno de los principales orígenes de las alteraciones metabólicas y la enfermedad cardiovascular. Pese a los avances en la prevención y el tratamiento de las dislipidemias, se intentan desarrollar nuevas terapias para su tratamiento o para reducir la absorción de lípidos. Los microRNAs (miRNAs) son elementos clave en la modulación de la expresión génica a nivel postranscripcional. Se localizan intracelular y extracelularmente, sirviendo como moléculas de señalización, siendo capaces de reflejar cambios fisiológicos y verse alterados en gran variedad de enfermedades. Además, su capacidad para regular simultáneamente diferentes genes da idea de la importancia de la actividad de los microRNAs en la regulación de multitud de procesos biológicos, tanto en la homeostasis como el desarrollo de la enfermedad. Aunque su papel en la regulación del metabolismo del colesterol y lípidos en diferentes tejidos se ha determinado con anterioridad, su conocimiento a nivel intestinal todavía es limitado. En este trabajo investigamos la importancia de los microRNAs a nivel intestinal utilizando un modelo de ratón (Mus musculus) knockout para Dicer1 específico de intestino, a través del cruce de dos líneas de ratones transgénicos (ratones Dicer1loxP/loxP con ratones Villin-cre). Con estos cruces se generó un KO condicional-espacial en el cual se produce la expresión controlada del gen de la recombinasa Cre bajo el promotor Villin, evaluándose el papel de los miRNAs en el enterocito y el metabolismo lipídico. Para ello se realizó un análisis de la expresión génica por PCR a tiempo real utilizando un array de genes implicados en el metabolismo de lipoproteínas y colesterol. Observamos una disminución de la mayoría de genes incluidos en el array, exceptuando Soat-1, Olr-1 y Hmgcs2. El estudio de la expresión proteica mediante Western blot para estos tres genes confirmó el aumento observado para OLR-1 y ...