Изолација и функционална карактеризација гена укључених у синтезу карнозинске киселине ; Isolation and functional characterization of the genes involved in the synthesis of carnosic acid.

Карнозинска киселина, фенолни дитерпен, поседује бројне биолошке активности због чега је потенцијално веома значајна за фармацеутску индустрију. Грчка жалфија (Salvia fruticosa Mill.) и рузмарин (Rosmarinus officinalis L.) богати су природни извори овог једињења. Иако је много тога познато у вези структуре и биолошких активности карнозинске киселине, веома мало се не зна о њеном биосинтетском путу у биљкама. Основни циљ дисертације био је изучавање биосинтезе карнозинске киселине на молекуларном нивоу, изолацијом и функционалном карактеризацијом гена укључених у овај процес. У ту сврху, извршена је анализа постојеће цДНК библиотеке жлезданих длака грчке жалфије, што је за резултат имало идентификацију два гена, названих SfCPS и SfKSL, који потенцијално кодирају дитерпен синтазе. Гени кандидати су изоловани и функционално окарактерисани у бактерији Escherichia coli Mig., квасцима (Saccharomyces cerevisiae Meyen ex E. C. Hansen) и дувану (Nicotiana benthamiana Domin). Хетеролога екпресија гена SfCPS и SfKSL резултирала је синтезом милтирадиена, што је утврђено GC-MS анализом и 1D и 2D NMR спектроскопијом (1H, 13C, DEPT, COSY H-H, HMQC и HMBC). За проналажење преосталих гена одговорних за биосинтезу карнозинске киселине, обављено је секвенционирање транскриптома грчке жалфије и рузмарина, уз коришћење 454 GS FLX Titanium платформе. На основу резултата фитохемијске анализе LC-PDA-LTQ-Orbitrap FTMS методом, жлездане длаке младих листова благо стресираних биљака генотипа “Кавуси” грчке жалфије и жлездане длаке млађих стадијума развоја комерцијалног генотипа рузмарина (B & T World Seeds) изабране су као биљни материјал за анализу транскриптома. ; Carnosic acid is a phenolic diterpene potentially highly significant for the pharmaceutical industry, due to its numerous biological activities. Cretan sage (Salvia fruticosa Mill.) and Rosemary (Rosmarinus officinalis L.) are rich natural sources of this compound. Although the structure and biological activities of carnosic acid are widely known, its biosynthetic pathway ...